Измерение стрессового ответа

Хотя было бы очень желательно определять, страдает ли и в каких ситуациях страдает животное-компаньон от воздействия стрессовых факторов и каков уровень его стрессового ответа, делать это систематично очень трудно. На состояние стресса обычно указывают поведенческие изменения или появление определенных поведенческих "проблем" (см. ниже), однако отсутствие поведенческой реакции не исключает наличия стресса, а выраженность поведенческой реакции на стрессовый фактор варьирует от особи к особи в широких пределах.
Уровень стресса можно измерить с помощью физиологических и поведенческих параметров. Каждый из этих параметров в отдельности способен указывать на ухудшение психологического здоровья, но лучше использовать их в сочетании для более надежной оценки стресса или благополучия (Mason, Mendl, 1993). Например, даже неадаптивные модели поведения, воспроизводимые в ответ на воздействие стрессовых факторов, снижают уровень физиологической стрессовой реакции.
Следовательно, измеряя уровень стресса по физиологическим параметрам, без учета поведенческих, невозможно получить точную картину восприятия животным окружающей его обстановки. Другой пример: животное, испытывающее сильный стресс, может вести себя пассивно (Duncan, Filshie, 1979), если оно неспособно отвечать на стрессовый фактор изменением поведения и повышением физиологических параметров или же не связывает свое состояние с окружающей обстановкой.
Физиологические измерения
Преимущество измерения физиологических параметров стрессовой реакции заключается в том, что они определяются количественно: их значения можно сравнивать со значениями, полученными у данного животного в других условиях или же у других особей. Однако сравнение и интерпретацию результатов затрудняет огромный разброс значений физиологических показателей, который обусловлен как индивидуальной реакцией на стрессовые факторы, так и нормальными колебаниями этих показателей в разное время суток (Rushen, 1991).
Более того, определяемые физиологические параметры варьируют как независимые величины. Сам процесс определения часто представляет трудности, поскольку необходимо приучить животных к процедурам измерения или взятия проб, иначе нельзя будет исключить влияние этих процедур на получаемые результаты (Mason, Mendl, 1993). Наконец, недостатком ряда методик измерения является необходимость инвазивного вмешательства.
Интенсивность стрессового ответа можно определить путем прямых измерений кровяного давления, частоты сердечных сокращений и частоты дыхания, однако эти параметры не являются специфичными для стресса: они возрастают и на фоне физической нагрузки. Чаще для оценки стрессового ответа используют показатели активности гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой системы, такие, как уровень кортизола и чувствительность надпочечников к стимуляции адренокортикотропным гормоном (Klemcke, 1994).
Но и эти тесты тоже не являются специфичными. Кортизол, например, обычно секретируется в импульсном режиме (Ladewig, 1987), поэтому содержание его в плазме быстро меняется, и однократное определение не является репрезентативным; кроме того, его уровень меняется в зависимости от суточного ритма, полового поведения (включая выкармливание детенышей) (Walker et al., 1992), социальной активности, а также при хроническом переохлаждении.
Кортизол. Содержание кортизола определяют в плазме, моче или кале. Уровень кортизола в плазме лучше всего отражает интенсивность стрессовой реакции на момент исследования, но он колеблется в зависимости от времени суток и к тому же на него влияет стресс, вызванный взятием пробы крови. Концентрация кортизола в моче отражает выраженность стрессовой реакции за предыдущие 4-8 часов, на протяжении которых моча накапливалась в мочевом пузыре, а метод взятия пробы менее инвазивен. Определение кортизола в моче чаще проводится у кошек, поскольку сравнительно легко собрать свежую мочу из кошачьего туалета с неабсорбирующим наполнителем.
Важно определять не абсолютное содержание кортизола в моче, а соотношение кортизол/ креатинин мочи, чтобы избежать влияния скорости выработки мочи на результат. Концентрация кортизола измеряется с помощью радиоиммунологического анализа (РИА), а креатинина — спектрофотометрическим методом.
Можно использовать определение кортизола в кале, хотя на мелких животных метод пока не вполне отработан. Измерения основаны на том, что методом РИА определяют выведение метаболитов кортизола, которые не являются видоспецифичными. По-видимому, данный метод недостаточно чувствителен для оценки изменений, происходящих в организме отдельной особи, но может быть весьма полезен в случаях, когда необходимо оценить благополучие большой группы животных на фоне изменений в окружающей их среде.
Данные об уровне кортизола имеют ценность, если измерения проводятся с целью изучения его динамики в течение определенного периода или под влиянием изменений условий среды; в рамках ветеринарной клиники определение кортизола редко имеет значение для диагностики.
Это объясняется тем, что его содержание в плазме не только подвержено влиянию многих факторов, включая время суток и стресс от пребывания в клинике, но и отличается большой индивидуальной вариабельностью, из-за чего требуется предварительное определение базального уровня кортизола, чтобы результаты исследования его динамики имели смысл. Изменение продукции кортизола в стрессовых условиях зависит от возраста и пола. Так, показано (Gamier et а/., 1990), что у сук кортизоловый ответ на новые средовые условия выражен сильнее, чем у кобелей, а базальный уровень кортизола зависит от фазы астрального цикла. Стоит также отметить, что повышение этого уровня при стрессовой реакции, как правило, не выходит за пределы "нормальных" значений для данного вида.
Адренокортикотропный гормон (АКТГ). Тесты с применением адренокортикотропной стимуляции коры надпочечников (вызывающей в норме выброс кортизола) используются в научных исследованиях при изучении эффекта средовых изменений на организм животного. Хроническая стимуляция адренокортикотропным гормоном снижает чувствительность коры надпочечников к этой стимуляции (Restrepo, Armario, 1987). Следовательно, измеряя кортикальный ответ на АКТГ до и после периода хронического стресса, можно обнаружить снижение чувствительности к стимуляции, выраженность которого будет отражать степень истощения коры надпочечников в результате стресса.
Как и в случае непосредственного определения кортизола, данные, получаемые в стимуляционном тесте с АКТГ, широко варьируют у животных одного вида. Поэтому для оценки результатов необходимо определять базовый уровень кортикального ответа или проводить повторные измерения. У животных, испытывающих стресс, уровень кортизола после введения АКТГ увеличивается по сравнению с базовым значением, но обычно не выходит за пределы нормальных показателей, установленных для данного вида. На результаты стимуляции адренокортикотропным гормоном влияют пол и возраст животных (Mendl et aL, 1992).
Пролактин. Пролактин может использоваться как индикатор стресса, но и в этом случае результаты следует интерпретировать весьма осторожно, поскольку выделение этого гормона колеблется в зависимости от времени года, фазы полового цикла у самок, вынужденной физической неподвижности, непрерывной нагрузки или продолжительного охлаждения (Manser, 1992).
Поведенческие измерения
Преимущество поведенческих измерений в том, что они неинвазивны и позволяют оценивать индивидуальные ответные реакции. Однако сопоставление данных таких измерений представляет определенные трудности из-за больших индивидуальных различий, связанных с возрастом, полом, наследственностью, предыдущим опытом (Broom, 1988). Формы поведения, проявляемые в определенной среде, обычно сравнивают с "нормальными" для данного вида. Это значительно труднее сделать для домашних видов, чем для содержащихся в неволе диких животных, потому что у первых возникли как генетические, так и обусловленные окружающей средой изменения, отдалившие их "диких", или предковых, форм. Сравнивая поведение домашней собаки и волка, не удастся выявить надежных критериев стрессовой реакции собаки. Кроме того, стрессовые факторы, имеющиеся в дикой природе (например, бегство от более крупных хищников, голод и переохлаждение), обычно не встречаются в домашней среде (Veasey et aL, 1996).